Time se skraćuje vrijeme razvijanja za približno jednu trećinu i omogućava ravnomjernije i pravilnije eluiranje komponenata . Napomena 3 : Smjesu za razvijanje treba mijenjati za svaku analizu, kako bi se postigli

je potrebno, osušenog ulja u odmjernu tikvicu od 50 ml ( 4.1.7. ) . Otopi se u oko 20 ml otapala za eluiranje ( 4.2.3. ), po potrebi uz lagano zagrijavanje radi lakšeg otapanja . Ohladi se na sobnu temperaturu

osiguralo da je silikagel u potpunosti prenesen u kolonu, čaša se nekoliko puta ispere smjesom otapala za eluiranje , prebacujući i to u kolonu . Otvaranjem pipca pri dnu kolone, otapalo se ispusti do visine od 1 cm

maslinovo ulje te najmanje 80 % za lampante i ulje komine maslina . Uključi se kromatograf . Otapalo za eluiranje ( 4.2.8. ) pumpa se kroz kolonu protokom od 1,5 ml / min, u cilju ispiranja čitavog sustava . Pričeka

zagrijavanje radi lakšeg otapanja . Ohladi se na sobnu temperaturu i nadopuni do oznake otapalom za eluiranje . Trbušastom pipetom unese se 20 ml otopine u kolonu pripremljenu kako je opisano u točki 4.3.1.,

čvrstoj fazi uz upotrebu SPE silikagel kolona . SPE silikagel kolona ( 1 g, 6 ml ) smjesti se u uređaj za eluiranje pod vakuumom i ispere sa 6 ml heksana . Vakuum se isključi kako se kolona ne bi isušila, a zatim se

željenih rezultata, tj. najmanje 2000 teoretskih tavana po metru duljine kolone za metil stearat i njegovo eluiranje za približno 15 minuta . Ako uređaj to dozvoljava, injektor treba biti na temperaturi od oko 200 C

Smjesu za razvijanje treba mijenjati za svaku analizu, kako bi se postigli savršeno ponovljivi uvjeti eluiranja . 5.2.3. Pripremi se približno 5 % - tna otopina neosapunjivog ( 5.1.5. ) u kloroformu i, pomoću mikrošprice

mora omogućiti jasno odvajanje pika trilinoleina od pikova triglicerida sličnog vremena zadržavanja . Eluiranje se provodi do pika ECN 52. Napomena 5 : Ispravno određivanje površina svih pikova važnih za analizu

određenim slučajevima, ova se dva postupka mogu kombinirati . Nakon programiranog zagrijavanja, nastavi se eluiranje pri konstantnoj temperaturi dok sve komponente nisu eluirane . Ako uređaj nema programirano zagrijavanje

oksidiranim uljima . 4.3.1. Priprema kromatografske kolone Kolona ( 4.1.3. ) se napuni s oko 30 ml otapala za eluiranje ( 4.2.3. ), a zatim se u kolonu unese nešto staklene vune ( 4.2.5. ), gurajući je do dna kolone staklenim

cikloheksan > heksan . Što je tvar jače adsorbirana na SF koristi se otapalo ( ili smjesa ) s većom moći eluiranja ( bliže početku niza ) . Tankoslojna kromatografija ili TLC ( engl . thin layer chromatography ) se

Prije svake kolonske kromatografije se pomoću TLC pronalazi najpogodnije otapalo ili smjesa otapala za eluiranje . Koristi se i u preparativne svrhe . Za to služe tzv. preparativne ploče koje su presvučene debljim

prisutne na kromatogramu, tako da ukupna površina ispod pikova predstavlja 100 % sastojaka ( potpuno eluiranje ) . Ako oprema uključuje integrator, koriste se na taj način dobivene brojčane vrijednosti . Ako ne

obzirom da bojilo ima retenciju između voskova i triglicerida, kada obojenje dostigne dno kolone, eluiranje treba obustaviti jer su svi voskovi eluirali . Tako dobivenu frakciju osušiti u rotacijskom vakuum-uparivaču

Prva frakcija sadrži zasićene ugljikovodike ( Slika 1 a. ), a druga steroidne ugljikovodike . Daljnjim eluiranjem dobiva se skvalen i srodni spojevi . U cilju zadovoljavajućeg razdvajanja između zasićenih i steroidnih

točki 4.3.1., otvori pipac i otapalo propusti do površine silikagela . Eluira se sa 150 ml otapala za eluiranje ( 4.2.3. ), podešavajući brzinu protoka na oko 2 ml / min ( 150 ml otapala treba proći kroz kolonu

koloni sa silikagelom ina kratkim Sep-Pak kolonama korištenjem niza otapala i njihovihsmjesa . Tijek eluiranja praćen je jednodimenzionalnom TLC uzspecifične bojene reakcije za ukupne lipide, glikolipide, fosfolipide

površina pikova . Rezultati se izražavaju na najmanje dva decimalna mjesta . Napomena 1 : Redoslijed eluiranja može se odrediti izračunavanjem ekvivalentnog broja ugljika, koji se često definira izrazom ECN =

vode od 5 % ( m / m ) . 4.2.5. Staklena vuna . 4.2.6. Aceton . 4.2.7. Acetonitril . 4.2.8. Otapalo za eluiranje za HPLC : acetonitril aceton ( omjer treba prilagoditi tako da se postigne željeni stupanj razdvajanja