Čeprav se integriteta polipeptidne verige zdi nespremenjena pa različni ekspresijski sistemi in različni pogoji gojenja kulture signifikantno spremenijo glikozilacijo.

Za ustrezno glikozilacijo je potreben ustrezen nabor encimov, ki se med organizmi razlikujejo.

Za kemijsko glikozilacijo so potrebni glikozilni donor in akceptor ter aktivacijski reagent.

Vsak gostiteljski sistem ima svoj edinstveni mehanizem za glikozilacijo, ki proizvaja proteine z lastnim glikanskim vzorcem.

V zadnjem koraku smo izvedli re-glikozilacijo proteina z aktiviranimi oksazoliranimi glikani in pomočjo encima glikosintaza.

V tej nalogi se bomo osredotočili predvsem na glikozilacijo oz. sialilacijo.

V rastnem mediju in mediju za dohranjevanje je veliko komponent, ki lahko vplivajo na glikozilacijo.

V rastlinah so običajno odporni na razgradnjo, saj jo preprečujejo z glikozilacijo (pri čemer nastajajo antocianini).

V prvem delu raziskovalne naloge smo se osredotočili na dobro poznano temo, glikozilacijo.

V prihodnje bomo razmislili o zamenjavi ekspresijskega sistema, da bi tako zagotovili tudi ustrezno glikozilacijo produkta in s tem njegovo večjo stabilnost.

V citosolu iz antocianidinov z glikozilacijo določenih hidroksilnih skupin na obročnih sistemih nastanejo antocianini, ki se skladiščijo v vakuolah celic.

Tudi v tem primeru nas je zanimal vpliv uporabljene platforme na glikozilacijo proteina.

To se dosega z: - glikozilacijo, pri kateri se dodajajo ogljikovi hidrati na proteinsko sekvenco.

Ti lahko spremenijo aktivnost encimov, ki so odgovorni za glikozilacijo, kar povzroči spremembe v strukturi in sestavi glikanskih verig.

Te specifične modifikacije vključujejo hidroksilacijo ali druge oksidativne reakcije, metilacijo in glikozilacijo.

Slednji hkrati opravlja tudi glikozilacijo, predvsem sfingolipidov, ki so namenjeni na plazemsko membrano.

S povečanjem koncentracije glukoze in manjšo nacepitveno koncentracijo nekoliko zakasnimo nadaljno glikozilacijo manoznih ostankov, kar je v skladu z našimi opazovanji.

Regulatorne agencije zahtevajo od biofarmacevtskih podjetij, da natančno določijo, spremljajo ter konzistentno ohranjajo glikozilacijo znotraj definiranih mej sprejemljivosti.

Razviti in testirati smo želeli genetsko orodje, ki omogoča tarčno zviševanje in zniževanje izražanja posameznih endogenih genov vpletenih v glikozilacijo.

Pridobivanje znanja o povezavah nam lahko pomaga zviševati titer in izvajati boljšo kontrolo kakovosti produkta v povezavi z glikozilacijo.